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MILE米乐转染试剂选择指南

来源:寿星利 日期:2025-03-13

细胞转染是一项将外源遗传材料引入目标细胞的技术,在生命科学研究、药物开发及新药研发中具有重要作用。化学转染法是生物技术中最常用的方法,其优点在于可以通过控制化学物质的浓度和作用时间等因素,实现对转染效率和时间的精确调控。

MILE米乐转染试剂选择指南

选择合适的转染试剂是确保细胞转染实验成功与高效的关键。目前市场上有多种转染试剂,转染效果各异。因此,如何选择最适合的产品呢?

1. 根据实验目的

依据实验需求选择稳定转染或瞬时转染。虽然两者的步骤相似,但对外源基因的要求不同。稳定转染通常使用带有复制能力的质粒或病毒载体,而瞬时转染则不需要。稳定转染常用脂质体类试剂,细胞通过内吞作用获得转染;瞬时转染则更多依赖纳米聚合物类试剂。

2. 根据细胞种类

不同细胞类型对转染效率的影响差异显著。例如,HEK293T细胞便于转染,选择性较低,因此常用于功能性蛋白和抗体的开发。然而,某些癌细胞如肝癌细胞(HepG2、HUH7)、人肺癌细胞A549等转染效率较低,给实验带来挑战。贴壁细胞和悬浮细胞在转染过程中对转染试剂的需求也不同,通常贴壁细胞使用脂质体介导的转染,而悬浮细胞则需要聚合物介导的转染方法。

3. 根据基因种类

转染通常涉及DNA和RNA两类物质。DNA转染旨在将外源DNA引入真核细胞,常用于基因表达和蛋白合成,而RNA转染主要用于引入干扰RNA以研究特定基因功能。部分RNA转染试剂在DNA转染中可能效果不佳,反之亦然。此外,随着DNA载体大小的增加,转染难度也随之加大。

4. 根据转染效果

理想的转染试剂应具备高效转染和低细胞毒性。高转染效率确保较多外源基因进入细胞,低细胞毒性则可提高细胞存活率,确保实验结果的可靠性。例如,脂质体转染试剂通常存在一定细胞毒性,其死亡率一般在15%到30%之间。而细胞死亡率控制在15%以下的转染试剂更具竞争力。

5. 根据操作简便性

选择操作简便、节省时间的转染试剂可显著降低实验时间成本。操作简便性包括转染前后是否更换培养基、试剂成分数量、孵育方式与时间、核酸溶液是否需稀释到特定浓度等。便利的操作确保实验顺利进行,并降低材料与时间成本。

MILE米乐转染试剂

MILE米乐的转染试剂如BGPNAM11/BGPNAM11Plus,主要以纳米阳离子聚合物为成分,能够有效与带负电荷的核酸分子结合,便于进入细胞,适用于siRNA和质粒DNA的转染。此系列产品在HEK293/293T细胞中的转染效率高达95%以上,细胞存活率达到85%。此外,操作简便,无需更换培养基,节省时间和材料成本。

客户反馈显示,MILE米乐的1LNP30iMate和3LNP60iMate等脂质体介导转染试剂对常规贴壁细胞的转染效率很高,且细胞毒性低,27小时后的细胞活率可达90%以上。这些优势让MILE米乐的转染试剂成为基因工程研究的理想选择,助力科研人员的实验。

MILE米乐转染试剂为您提供高效与安全的选择,以助于您的基因工程实验顺利进行。

实验干货

影响转染的几个关键因素

1)抗生素:常用的抗生素可以影响转染效果,阳离子脂质试剂可能增加细胞通透性,降低细胞活性。
2)血清:血清可能影响复合物形成,因此需优化转染条件以确保转染效率。
3)细胞代数:推荐使用经过1-2次传代的细胞,以保持细胞的活力。
4)细胞密度:不同转染试剂对细胞密度的要求有所不同,理想的细胞密度需达60%-90%。
5)核酸质量:高纯度、无内毒素的核酸有助于提高转染效果。

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