### 多克隆抗体与单克隆抗体的比较

**多克隆抗体（polyclonal antibody, pAb）**是通过免疫动物用含有多种抗原决定簇的抗原来产生的。这种免疫方式会激活多个B细胞克隆，从而产生针对多种抗原表位的不同抗体。因此，获得的免疫血清实际上是多种抗体的混合物，即多克隆抗体。与此不同，**单克隆抗体（monoclonal antibody, mAb）**是由单一B细胞克隆所产生的，具有高度一致性，并仅针对特定的抗原表位。单克隆抗体的生产通常采用杂交瘤技术，这种方法是将具有特异性抗体分泌能力的B细胞与无限繁殖的骨髓瘤细胞融合制备而成。

#### 单抗与多抗的优缺点

**多克隆抗体的优点：**

• 能够放大低表达水平的靶蛋白信号；
• 能够识别多个表位；
• 对抗原中的微小变化更具容忍度；
• 可以识别与免疫原蛋白质具有高同源性的蛋白，或者筛选来自非免疫原物种的靶蛋白；
• 通常是检测变性蛋白的首选；
• 多表位识别提供更强的检测效果。

**多克隆抗体的缺点：**

• 容易出现批次间差异；
• 可能产生大量非特异性抗体，导致背景信号；
• 不适用于探测抗原的特定结构域，因抗血清可能识别多个结构域。

**单克隆抗体的优点：**

• 杂交瘤制备后成为恒定的再生源，批次间一致；
• 切片和细胞染色的背景较低；
• 具有特异性，适合于分析测定中的一抗或检测组织中的抗原，通常背景染色显著低；
• 同质性非常高；
• 其特异性能使其在混合物中高效结合抗原。

**单克隆抗体的缺点：**

• 虽然可产生大量特异性抗体，但可能特异性过强；
• 经化学处理后更容易丢失表位，但可通过使用同一抗原的多种单克隆抗体来补偿。

#### 单抗与多抗的选择

面对高特异性需求的实验，并且希望长期使用一致的抗体，**MILE米乐**建议选择单克隆抗体。如果实验需要高灵敏度或应用范围如WB/IP/IF/ICC等，可以优先考虑单克隆抗体。相对于多克隆抗体，单克隆抗体在特异性、一致性方面有显著优势，尤其在免疫检测中更能减少背景信号。

然而，在处理沉淀和凝集反应检测性实验或ELISA检测时，选择多克隆抗体也是合适的。多克隆抗体的制备时间短且成本低，有时在灵敏度检测上也表现较为出色，尤其对于丰度偏低的蛋白。

#### 抗原的选择

抗原的来源包括天然蛋白、重组可溶蛋白、重组变性蛋白和多肽。高质量的抗原可以显著提高高质量抗体的制备几率。目前，重组蛋白或多肽常被用作抗原，因为它们通常含有更多的抗原决定簇，能更全面地刺激免疫反应。

在选择抗原多肽时，通常遵循以下基本原则：

• 尽量选择蛋白表面序列；
• 避免形成α-helix结构；
• N端和C端的肽段优于中间段；
• 避免重复或接近重复的序列；
• 避免同源性过强的肽段；
• 交联可在N、C两端进行，选择对抗体生成影响较小的一端；
• 尽量减少Pro的数量，但适当的Pro有助于稳定肽链结构，对产生特异性抗体有益。

在生物医疗领域，选择合适的抗体类型和抗原对于实验的成功至关重要，**MILE米乐**在这一过程中能够为您提供可靠的支持和服务。