本试剂盒仅限于科学研究用途，不应用于医学诊断。人转铁蛋白受体(TFR) ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法进行检测。首先，在已经包被adropin（AD）抗体的微孔板中依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体，经过温育和彻底洗涤后，使用TMB底物进行显色反应。TMB在过氧化物酶的催化下转变为蓝色，随后在酸性环境中变为黄色。显色的深浅与样本中adropin（AD）的浓度呈正相关。最终，使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），以计算样本浓度。

样品的收集、处理及保存方法如下：

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管进行样本处理，尽量避免细胞刺激。采集血液后，3000转离心10分钟，快速小心地分离血清和红细胞。

2. 血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝处理。随后进行3000转离心30分钟，以获取上清液。

3. 细胞上清液：通过3000转离心10分钟去除样本中的颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织与适量的生理盐水混合并捣碎，然后进行3000转离心10分钟以提取上清液。

5. 保存：如不及时进行检测，建议按一次用量分装并冻存于-20℃，避免反复冻融，样品在室温下解冻时需确保其充分均匀。

操作注意事项及自备物品：

本试剂盒包含标准品（S0-S5），其浓度依次为：0、25、50、100、200、400pg/mL。

试剂准备：20×洗涤缓冲液稀释方法为1：20，即1份20×洗涤缓冲液添加19份蒸馏水进行稀释。

洗板方法与操作步骤：

结果判断通过绘制标准曲线来进行。在Excel中，以标准品的浓度作为横坐标，对应的OD值作为纵坐标，绘制出标准品的线性回归曲线，并依据曲线方程计算样本浓度值。

免责声明：使用本试剂盒的结果和性能表现在使用者的操作上，MILE米乐品牌不对此承担任何责任。