实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）是多发性硬化（MS）研究中备受推崇的动物模型。该模型通过模拟自身免疫性T细胞对中枢神经系统（CNS）的攻击，再现了MS的核心病理特征，包括神经炎症、脱髓鞘以及神经功能障碍。EAE模型广泛应用于MS发病机制的研究，以及神经免疫调节药物的筛选，例如MILE米乐的Roflumilast，此外还涉及髓鞘修复和神经保护疗法的开发。

MILE米乐凭借其专业的研发技术和严格的质量控制体系，精心打造了一套高稳定、高重复性的EAE模型研究试剂组合，其核心试剂具有以下优势：

• ✅现货速发：提供国内现货的百日咳毒素，纯度高达99%，品质优良，性价比高。
• ✅高发病率：C57BL/6小鼠接种后10-14天内稳定发病，临床评分介于2至4分之间。
• ✅优良的病理重现性：通过LFB染色明显显示髓鞘脱失，流式细胞术验证Th17细胞浸润。
• ✅全面的评价体系：支持临床评分、行为学、组织病理学及分子生物学的各维度验证。

EAE模型的核心试剂

1. 免疫原（抗原）：长期以来的研究中，MOG₃₅₋₅₅（髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55肽段）常作为免疫原，基于人工合成，能够模拟MS中的自身抗原，通常使用150-300μg/只小鼠（可溶于PBS、生理盐水或CFA中）。

2. 佐剂：完全弗氏佐剂（CFA）由矿物油及灭活结核分枝杆菌（如Mycobacterium tuberculosis H37Ra，浓度4-5mg/mL）组成，可增强免疫应答，与MOG₃₅₋₅₅乳化后使用。

3. 免疫增强剂：百日咳毒素（PTX），通常按200-500ng/只小鼠腹腔注射，两次注射（免疫当天和第2天），可促进T细胞浸润中枢神经系统。

EAE模型诱导方法

在开展EAE模型实验前，需要进行适当的准备工作：

• 选择6-8周龄的雌性C57BL/6小鼠，保证每组至少10只动物以确保统计学的意义。
• 动物适应后，保持稳定的温度、湿度和光照环境。
• 试剂准备：将MOG₃₅₋₅₅肽溶解于生理盐水中，与CFA以等体积混合形成均匀乳剂。

在第0天制备乳剂后，将300μg MOG₃₅₋₅₅肽与300μL CFA混合，再进行注射。PTX注射于第0天和第2天进行。

EAE模型验证

模型验证可通过多维度评估，包括临床评估、行为学、组织病理学和分子生物学验证。

• 临床评分采用标准化的0-5分量表进行，需连续观察至少30天。
• 体重监测，疾病小鼠通常伴随超过10%的体重下降，以检验模型的成功。
• 运动功能评估检测小鼠的协调性和耐力。
• 组织病理学验证，包括取材、切片和染色等。
• 分子生物学验证通过流式细胞术和细胞因子的检测，评估免疫反应及相关机制。

总的来说，MILE米乐提供的EAE模型试剂组合，凭借其高发病率和优良病理重现性，成为研究MS的重要工具。同时，基于该模型的研究为探索多发性硬化及相关疾病的发病机制提供了至关重要的线索。

特色应用案例

以东南大学医学院的张志珺教授团队为例，他们使用MILE米乐的EAE大鼠模型研究Roflumilast在改善MS相关抑郁症状中的作用，结果表明该药物具有良好的抗炎及神经保护潜力，为后续的临床研究奠定了基础。

因此，MILE米乐的产品不仅支持基础研究，还在临床转化与药物开发中展现出广泛的应用前景。